慢病毒載體可感染分裂細胞及非分裂細胞。其轉移基因片段容量較大，目的基因表達時間較長，不易引發(fā)宿主免疫反應等諸多優(yōu)點；因此，慢病毒己經成為表達外源基因或外源shRNA的常用載體形式之一， 并且應用越來越廣泛。

慢病毒濃縮液介紹

EZ慢病毒濃縮液是一種快速濃縮慢病毒的產品，使用未濃縮病毒上清與本產品低溫孵育后低速離心即可獲得濃縮病毒液。不同于傳統(tǒng)的耗時耗力的超濾、超速離心法，使用本產品操作簡便、快捷、安全，回收率高。

慢病毒濃縮液優(yōu)勢

 ? 高濃縮比：濃縮體積高達240倍，如：可將120mL的病毒上清濃縮至500uL；

 ? 高回收率：經測試，病毒的回收率高達92%；

 ? 高濃縮滴度：經測試，使用本產品濃縮后病毒滴度往往可達108或109高病毒；

 ? 高病毒活性：濃縮后病毒具有更佳的轉導效果。

慢病毒濃縮液操作步驟

① 收集 48 h 和 72 h 的 293T 細胞慢病毒上清液，4℃， 2000 g 離心 10 min。 

② 上清液用 0.45 μm 濾膜過濾，去除細胞碎片。【注】：濾膜需使用低蛋白吸附的纖維素醋酸酯或聚醚 砜(PES)膜。切忌用硝酸纖維素膜(NC)。 

③ 按慢病毒過濾液體積:濃縮試劑體積= 4:1 比例混合，搖勻，4℃ 靜置過夜，或冰上孵育至少 3 h，適當 延長孵育時間可提高慢病毒的回收率。 

④ 完成孵育后，4℃，3500 g 離心 15 min，小心吸去上清液。

⑤ 用適量體積 PBS 輕輕反復吹吸病毒沉淀，重懸慢病毒。 

⑥ 留少許病毒液測定滴度，其他分裝后保存于-80℃。【注】：因凍融會顯著降低慢病毒活性，請務必分 裝保存。

慢病毒濃縮液注意事項

 • 本產品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。

 • 慢病毒相關實驗操作請在生物安全柜內完成。

 • 注意將濃縮試劑和病毒液充分混合。

 • 細胞的生長狀態(tài)對于病毒包裝至關重要，因此需保證良好的細胞生長狀態(tài)和較少的細胞傳代次數(shù)。

 • 病毒切勿反復凍融，如果實在需要凍融，次數(shù)盡量不要超過 3 次，每凍融一次大約有 10%左右的病毒損失，應按照每次使用的病毒量來分裝，保存于-80℃。保存時間盡量不要超過 6 個月。