久久久久国产一区二区三区,三上悠亚人妻中文字幕在线,蜜臀AV夜夜澡人人爽人人,麻豆AV福利AV久久AV

您好!歡迎訪問和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
咨詢熱線

18616108315

當前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 真核細胞轉(zhuǎn)染試劑說明書,高效轉(zhuǎn)染試劑使用方法

真核細胞轉(zhuǎn)染試劑說明書,高效轉(zhuǎn)染試劑使用方法

更新時間:2024-02-04      點擊次數(shù):1893

EZ Trans細胞轉(zhuǎn)染試劑作為新一代的轉(zhuǎn)染試劑,其轉(zhuǎn)染原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進入細胞。本產(chǎn)品經(jīng)過李記生物的優(yōu)化處理,具有轉(zhuǎn)染效率高,細胞毒性低,操作簡單,重復性好,適用范圍廣等特點。

以下為真核細胞轉(zhuǎn)染試劑說明書:

轉(zhuǎn)染試劑運輸與保存

藍冰運輸。4℃保存,有效期12個月。】:不可冷凍!

高效轉(zhuǎn)染試劑使用方法(以 24 孔板為例,其他培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)染請參考表1)

1. 接種細胞

對于貼壁細胞,轉(zhuǎn)染前18-24 h進行鋪板(不含抗生素),使其在轉(zhuǎn)染時的密度大約在80%左右。對于懸浮細胞,轉(zhuǎn)染當天,配制EZ Trans-DNA復合物之前進行鋪板,每500 µL生長培養(yǎng)基中加入4~8×105cells。  

【注】:培養(yǎng)液中的血清不影響轉(zhuǎn)染效率。轉(zhuǎn)染試劑使用量受細胞類型及其他實驗條件影響,建議初次使用時設(shè)置梯度進行優(yōu)化最佳使用量。

2. 準備EZ Trans-DNA復合物

(1)對于每孔細胞,將1 μg質(zhì)粒DNA稀釋到40 μL無血清的高糖DMEM培養(yǎng)基(或者OPTI-MEM Ⅰ 培養(yǎng)基),混勻。

(2)對于每孔細胞,將3 μL EZ Trans轉(zhuǎn)染試劑稀釋到40 μL無血清的高糖DMEM培養(yǎng)基(或者OPTI-MEM Ⅰ 培養(yǎng)基),輕輕混勻。

【注】:無血清的高糖DMEM培養(yǎng)基是稀釋液,不能使用含血清的培養(yǎng)基進行DNA和EZ Trans轉(zhuǎn)染試劑的稀釋。因為EZ Trans-DNA轉(zhuǎn)染復合物的形成過程不能含有血清。

(3)將稀釋好的EZ Trans轉(zhuǎn)染試劑盡快全部加入到已稀釋好的質(zhì)粒DNA中,輕輕混勻。

【注】:此混合的順序不能反向進行。

(4)室溫放置10-15 min,以形成EZ Trans-DNA復合物。

3. 轉(zhuǎn)染細胞

(1)將上述80 μL EZ Trans-DNA轉(zhuǎn)染復合物均勻滴入到含細胞的培養(yǎng)皿中。輕輕晃動培養(yǎng)皿或輕微振蕩,讓EZ Trans-DNA復合物分散均勻。

(2)在37℃,5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)6-18 h,去除含EZ Trans-DNA復合物的培養(yǎng)液,更換新的培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)至對轉(zhuǎn)入基因表達分析。

【注】:篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株,轉(zhuǎn)染細胞24 h后,將細胞傳代至新鮮的生長培養(yǎng)基中(將細胞稀釋10倍以上),在37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中孵育24 h,加入篩選培養(yǎng)基。在有轉(zhuǎn)染抗性基因相匹配的藥物篩選條件下,約 1~2周可篩選到耐藥性克隆,在這期間需經(jīng)常更換含篩選藥物的生長培養(yǎng)基。

注意事項

  1. 本產(chǎn)品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

微信咨詢
地址:上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄 傳真:021-50724961
©2025 和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備2023007219號-1
精品无码国产自产拍在线观看| 无码人妻精品一区二区蜜桃网站| 最近中文字幕在线看免费完整版| 国产成年无码AV片在线韩国| A级毛片无码免费真人久久 | 免费看真人直播| 色欲欲WWW成人网站| 含羞草国产亚洲精品岁国产精品| 麻豆E奶女教师国产剧情| 迎合疯狂肉伦耕耘播种| 护士奶头又白又大又好摸视频| А天堂中文最新版在线官网| 日久精品不卡一区二区| AV免费观看| 亚洲成AV人电影在线观看| 久久久亚洲AV成人无码精品网站 | 亚洲爆乳无码一区二区三区| 寂寞熟妇风间ゆみ中文| 成人午夜性A级毛片免费| 欧美人与物VIDEOS另类| 色欲久久久天天天综合网| 久久aaaa片一区二区| 中文字幕一区二区三区久久网站| 中文人妻熟女乱又乱精品| 国产精品美女久久久久浪潮AV | 99久久久久99国产免费AV| 日本护士撒尿xxxx| 亚洲A片无码精品毛片| 亚洲AV无码A片在线观看蜜桃 | 日本免费无码一区二区到五区| 欧美虐SM另类残忍视频| 野花日本韩国免费视频6| 国产动作大片中文字幕| 偷窥 性别 瘾 XXXXX| 邻居少妇张开双腿让我爽一夜 | 欧美AV在线观看| 免费精品人在线二线三线区别| 久久久久女人精品毛片| 成人性生交大片免费看9| 无码GOGO大胆啪啪艺术| 无码熟妇人妻AV在线影片软件|